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肌苷酸二鈉
CAS No.: 4691-65-0
分子式: C10H11N4Na2O8P
分子量: 392.17
備注: 中文名稱肌苷酸二鈉中文同義詞肌甙酸二鈉;肌苷酸二鈉;DISODIUM5’-INOSINATE5’-肌苷酸二鈉;肌苷酸二鈉鹽;肌苷單磷酸二鈉鹽;次黃苷-5’-磷酸二鈉鹽(+4℃);肌苷-5’-單磷酸二鈉;肌苷酸二鈉,次黃苷-5’-單磷酸鹽英文名稱Disodium5’-Inosinate英文同義詞Disodium5’-IMP;Disodium9-[(2R,3R,4R,5R)-3,4-dihydroxy-5-(phosphonatooxymethyl)oxolan-2-yl]-3H-purin-6-one;disodiuminosine5’-phosphate;INOSICACIDDISODIUMSALT;IMPSODIUMSALT;IMP,NA2;IMPDISODIUMSALT;IMP2NACAS號4691-65-0分子式C10H14N4NaO8P分子量372.21EINECS號225-146-4相關(guān)類別增味劑;有機原料;酯;飼料添加劑;誘食劑和增香劑;嘧啶核苷酸;其他生化試劑;對照品;化工原料;生化試劑-植物激素及核酸類;核苷酸及其衍生物;核酸類;Biochemistry;Nucleosides,Nucleotides&RelatedReagents;Nucleotidesandtheiranalogs;調(diào)味劑;調(diào)味劑(風(fēng)味增強劑);食品添加劑;生物化學(xué)品;原料;中藥對照品;有機化工原料;有機化學(xué);體外診斷試劑;診斷試劑系列-診斷試劑系列;通用生化試劑-核酸;生物試劑;化工原料Mol文件4691-65-0.mol結(jié)構(gòu)式肌苷酸二鈉性質(zhì)熔點175°CFEMA3669|DISODIUM5-INOSINATE儲存條件2-8°C形態(tài)結(jié)晶粉末顏色白色氣味(Odor)無味穩(wěn)定性穩(wěn)定的。與強氧化劑不相容。LogP-1.02CAS數(shù)據(jù)庫4691-65-0(CASDataBaseReference)EPA化學(xué)物質(zhì)信息5’-Inosinicacid,disodiumsalt(4691-65-0)肌苷酸二鈉用途與合成方法性狀白色粉末性質(zhì)肌苷酸二鈉為無色至白色結(jié)晶,或白色結(jié)晶性粉末,含約7.5分子結(jié)晶水,不吸濕,40℃開始失去結(jié)晶水,120℃以上成無水物。味鮮,鮮味閾值為0.025g/100mL,鮮味強度低于鳥苷酸鈉,但二者并用有顯著的協(xié)同作用。當(dāng)二者以1:1混合時,鮮味閥值可降至0.0063%。與0.8%谷氨酸鈉并用,其鮮味閥值更進一步降至0.000031%。溶于水,水溶液穩(wěn)定,呈中性。在酸性溶液中加熱易分解,失去呈味力。亦可被磷酸酶分解破壞。微溶于乙醇,幾乎不溶于乙醚。用途肌苷酸二鈉作為增味劑,營養(yǎng)添加劑鑒別試驗紫外吸光度用0.01mol/L鹽酸配制1/50000試樣液,該溶液在波長250nm±2nm處有最大吸收值。A250/A260為1.55~1.65,A280/A260為0.2~0.3。核糖試驗及有機磷酸鹽試驗均陽性,方法同“02006,5L鳥苷酸二鈉”。鈉鹽反應(yīng)陽性(IT-28)。溶解性溶于水,微溶于乙醇,幾乎不溶于乙醚。.含量分析準(zhǔn)確稱取試樣約500mg,移入1000ml容量瓶內(nèi),用0.01mol/L鹽酸溶解后定容,混合。取此溶液10.0ml移入250ml容量瓶中,以0.01mol/L鹽酸定容,混合。用0.01mol/L鹽酸液作為對照樣,在波長250nin處測吸光度(A),液層寬1crn。試樣中肌苷酸二鈉(C10H11N4Na2O8P)的含量按下式計算:肌苷酸二鈉含量(%)=A/310×25000/試樣量(mg)×100/(100-水分(%))×100毒性ADI不作特殊規(guī)定(FAO/WHO,2001)。LD5014.4g/kg(大鼠,經(jīng)口)。0.1%~1.0%飼料量慢性試驗飼養(yǎng)大鼠6個月后,體重增加,血漿、肝、腎、脾、睪丸、心、肺等重量及組織均無異?,F(xiàn)象。安全性高??砂踩糜谑称?FDA,§172.535,2000)。EEC—HACSG規(guī)定不得用于嬰幼兒食品。使用限量GB2760—96:各類食品,以GMP為限。FAO/WHO(1994):午餐肉、火腿、咸肉等肉類化學(xué)性質(zhì)無色至白色結(jié)晶,或白色結(jié)晶性粉末。平均含7.5個分子的結(jié)晶水。無臭,有特殊滋味。味覺閾值0.012%。不潮解。熔點不明顯,180℃時呈褐色,230℃左右時分解。性穩(wěn)定,在一般食品加工條件下(Ph值為4~7)、100℃加熱1h無分解現(xiàn)象。與L-谷氨酸鈉對鮮味有相乘效應(yīng)(如以肌苷酸鈉與L-谷氨酸鈉之比為1:7,即有明顯增強鮮味的效果)。其鹽酸溶液的最大吸收波長為250nm士2nm。遇動植物中磷酸酯酶可分解而失去鮮味。44℃開始失去結(jié)晶水,120℃以上成無水物。易溶于水(13g/100ml,20℃),水溶液呈中性,微溶于乙醇,幾乎不溶于乙醚。天然品存在于鮪魚等中。用途鮮味劑。如在醬油中加入5~10萬分之一,即呈特殊鮮味。一般均與味精、鳥苷酸鈉等合用,以提高增鮮效果。用途肌苷酸鈉液時國內(nèi)外允許使用的呈味劑,較少單獨應(yīng)用,常與味精一起混合使用,混用時鮮味有相乘的作用。我國規(guī)定可用于各類飼料、食品添加劑,按生產(chǎn)需要適量使用。用途肌苷酸鈉也是國內(nèi)外允許使用的呈味劑,單獨應(yīng)用較少,常與味精混合一起使用,混用時鮮味有相乘的作用。我國規(guī)定可用于各類食品,按生產(chǎn)需要適量使用。用途主要用于各種原因引起的白細(xì)胞減少和急慢性肝病。生產(chǎn)方法方法一、肌苷酸脫磷酸法肌苷酸二鈉的制備棒狀桿菌269發(fā)酵,發(fā)酵液去菌體,吸附,洗脫,濃縮,加乙醇,pH7-7.5條件下結(jié)晶可得肌苷酸二鈉。棒狀桿菌269[發(fā)酵]→發(fā)酵液[去菌體,吸附,洗脫,濃縮]→濃縮液[乙醇]→[pH7-7.5]肌苷酸二鈉肌苷粗品的制備在乙酸緩沖液中,調(diào)pH5.4-5.6,加壓137-147kPa,脫磷酸5h,可得肌苷粗品。肌苷酸二鈉[乙酸,加壓]→肌苷精制蒸餾水溶解,pH=6,重結(jié)晶,可得精品。方法二、一步發(fā)酵法菌株選育變異芽孢桿菌7171-9-1移接到斜面培養(yǎng)基上,30-32℃培養(yǎng)48h。斜面培養(yǎng)基成分為葡萄糖1%,蛋白胨0.4%,酵母浸膏0.7%,牛肉浸膏1.4%,瓊脂2%,在pH7、120℃滅菌20min。變異芽孢桿菌7171-9-1[斜面培養(yǎng)]→[30-32℃,48h]菌種斜面種子培養(yǎng)一級種子:培養(yǎng)基成分為葡萄糖2%,蛋白胨1%,酵母浸膏1%,玉米漿0.5%,尿素0.5%,氯化鈉0.25%。滅菌前pH7,用1L三角瓶裝150ml培養(yǎng)基,115℃滅菌15min。每個三角瓶中接入白金耳環(huán)菌苔,在往復(fù)式搖床上,32℃±1℃培養(yǎng)18h。二級種子:培養(yǎng)基同一級種子,放大50L發(fā)酵罐,定容體積25L,接種量3%,32℃±1℃培養(yǎng)12-15h,攪拌速度320r/min,通風(fēng)量1:0.25V/(V·min),生長菌指標(biāo)A(650nm)=0.78,pH=6.4-6.6。菌種斜面[搖床振蕩]→[pH7,32℃±1℃,18h]一級種子培養(yǎng)液[50L發(fā)酵罐]→[pH6.4-6.6,32℃±1℃,12-15h]二級種子培養(yǎng)液發(fā)酵50L不銹鋼標(biāo)準(zhǔn)發(fā)酵罐,定容體積35L。培養(yǎng)基成分為淀粉水解糖10Chemicalbook%,干酵母水解液1.5%,豆餅水解液0.5%,尿素0.4%,硫酸鎂0.1%,氯化鉀0.2%,磷酸氫二鈉0.5%,硫酸銨1.5%,有機硅油0.05%。pH=7,接種量0.9%,32℃±1℃培養(yǎng)93h,攪拌速度320r/min,通風(fēng)量1:0.5V/(V·min)。500L發(fā)酵罐,定容體積350L。培養(yǎng)基成分為淀粉水解糖10%,干酵母水解液1.5%,豆餅水解液0.5%,硫酸銨1.5%,硫酸鎂0.1%,氯化鉀0.2%,磷酸氫二鈉0.5%,碳酸鈣1%,有機硅油小于0.3%。pH=7,接種量7%,32℃±1℃培養(yǎng)75h,攪拌速度230r/min,通風(fēng)量1:0.25V/(V·min)。20000L發(fā)酵罐,培養(yǎng)基同上,接種量2.5%,35℃±5℃培養(yǎng)83h。二級種子培養(yǎng)液[50L發(fā)酵罐]→[pH7,32℃±1℃,93h]發(fā)酵液[500L發(fā)酵罐]→[pH7,32℃±1℃,75h]發(fā)酵液[20000L發(fā)酵罐]→[pH7,35℃±1℃,83h]發(fā)酵液提取、吸附、洗脫將發(fā)酵液30-40L調(diào)pH=2.5-3,連同菌體通過2個串聯(lián)的3.5kg732H樹脂柱吸附。用相當(dāng)于樹脂總體積3倍的pH3水洗1次,把兩柱分開,用pH3水把肌苷洗脫下來,再經(jīng)769活性炭柱吸附肌苷,先用2-3倍體積的水洗滌,再用70-80℃水洗,70-80℃,1mol/L氫氧化鈉溶液浸泡30min,最后用0.01mol/L氫氧化鈉溶液洗脫肌苷,收集洗脫液,真空濃縮,pH11或6放置,過濾,得粗品。發(fā)酵液[732樹脂柱]→[pH2.5-3]吸附物[水]→[pH2.5-3]洗脫液[769活性炭柱]→吸附物[蒸餾水,氫氧化鈉]→[70-80℃][氫氧化鈉]→[70-80℃]洗脫液[濃縮結(jié)晶]→[pH11或6]肌苷粗品精制將粗品配成5%-10%的溶液,加熱溶解,抽濾,冷卻,過濾,少量水洗,烘干,即得肌苷精制品。肌苷粗品[蒸餾水]→[重結(jié)晶]肌苷成品。生產(chǎn)方法核糖核酸(RNA)水解法細(xì)胞中含有核糖核酸和脫氧核糖核酸(DNA),而RNA水解可得4種核苷酸:腺苷酸、鳥苷酸、胞苷酸和尿苷酸,其中鳥苷酸和由腺苷酸轉(zhuǎn)化而來的肌苷酸是呈味物質(zhì)。核苷酸有2’-核苷酸、3’-核苷酸和5’-核苷酸,其中只有5’-核苷酸即5’-鳥苷酸和5’-肌苷酸具有呈味性能。RNA的提取常以RNA含量較高的酵母(最為常用)和白地霉細(xì)胞(含RNA4~11%)為原料,采用稀堿液抽提。將酵母干細(xì)胞用水配成5%~10%的懸浮液,加入氫氧化鈉使其質(zhì)量分?jǐn)?shù)達1%;在20℃下攪拌30~45min,再用6mol/L的鹽酸中和至Ph=7.0;加熱至900c時保溫10min,以殺滅霉菌,再冷卻至2~4℃靜置2~3d;取上層清液用6mol/L的鹽酸調(diào)Ph值至2.5(RNA等電點),在2~4℃靜置過夜;過濾得RNA,并用乙醇洗滌、干燥得RNA含量60%~70%的產(chǎn)品,產(chǎn)率4%~5%。酵母細(xì)胞也可在6%、8%的鹽酸中浸提。RNA水解在30℃下將橘青霉菌ThoM的紫外線變異株N-10-14用麩皮培養(yǎng)5d,用90L的水抽提50kg的曲,得89L含有強力核酸酶P1(5’-磷酸二酯酶)的抽提液;將400mL酶液加入10L0.8%的RNA溶液中,調(diào)Ph值為5.6,并在65℃下反應(yīng)2h,得混合核苷酸(腺苷酸0.22%、鳥苷酸0.19%、尿苷酸0.18%和胞苷酸0.14%)。核苷酸的分離利用各種核苷酸具有不同的等電點,用強堿性陰離子交換樹脂來分離。將上述核苷酸混合液調(diào)Ph值至8,用國產(chǎn)717樹脂上柱吸附,再依次用0.02mol/L甲酸、0.15mol/L甲酸、0.01mol/L甲酸-0.05mo1/LI甲酸鈉和0.1mol/L甲酸-0.1mol/L甲酸鈉洗脫,分別得到胞苷酸、腺苷酸、尿苷酸和鳥苷酸。從腺苷酸制備肌苷酸鈉在30℃下用麩皮培養(yǎng)米曲霉48h,加10倍的水浸泡3h,得脫氨酶液;在腺苷酸液中加入10%的脫氨酶液,并在50~60℃和Ph=6下反應(yīng)3h;加熱至100℃以殺酶,過濾,取清液真空濃縮、結(jié)晶得產(chǎn)品肌苷酸二鈉。發(fā)酵法生產(chǎn)5L肌苷酸鈉生產(chǎn)中主要采用的發(fā)酵法為葡萄糖直接發(fā)酵法,或葡萄糖發(fā)酵生產(chǎn)肌苷,再磷酸化生成肌苷酸。直接發(fā)酵法——一步法以葡萄糖為碳源,異變株或產(chǎn)氨短桿菌為生產(chǎn)菌,直接發(fā)酵生產(chǎn)肌苷酸。二步法以60~70g/L的葡萄糖為碳源,以枯草芽孢桿菌為生產(chǎn)菌,在30~32℃、Ph=5~7下發(fā)酵80h生產(chǎn)肌苷;肌苷再與磷酸三乙酯反應(yīng)生成肌苷酸。生產(chǎn)方法1核糖核酸(RNA)水解法細(xì)胞中含有核糖核酸和脫氧核糖核酸(DNA),而RNA水解可得4種核苷酸:腺苷酸、鳥苷酸、胞苷酸和尿苷酸。其中鳥苷酸和由腺苷酸轉(zhuǎn)化而來得肌苷酸是呈味物質(zhì)。核苷酸有2’-、3’-和5’-核苷酸,其中只有5’-核苷酸即5’-鳥苷酸和5’-肌苷酸具有呈味性能。(1)RNA的提取。常以RNA含量較高的酵母(最為常用)和白地霉細(xì)胞(含RNA4%-11%)為原料,采用稀堿液抽提。將酵母干細(xì)胞用水配成5%-10%的懸浮液,加入氫氧化鈉使其質(zhì)量分?jǐn)?shù)達1%;在20℃下攪拌30-45min,再用6mol/L的鹽酸中和至PH=7.0,加熱至90℃時保溫10min,以殺滅霉菌,再冷卻至2-4℃靜置2-3天;取上層清液用6mol/L的鹽酸調(diào)PH至2.5(RNA等電點),在2-4℃靜置過夜;過濾得RNA,并容乙醇洗滌、干燥得RNA含量60-70%的產(chǎn)品,產(chǎn)率4%-5%酵母細(xì)胞也可在6%-8%的鹽酸中浸提。(2)RNA水解。在30℃下將橘青霉素ThoM的紫外線變異株N-10-14用麩皮培養(yǎng)5天,用90L的水提取50kg的曲,得89L含有強力核算酶P1(5’-磷酸二酯酶)的抽提液;將400mL酶液加入10L0.8%的RNA溶液中,調(diào)PH為5.6,并在65℃下反應(yīng)2h,得混合核苷酸(腺苷酸0.22%、鳥苷酸0.19%和胞苷酸0.14%)。(3)核苷酸的分離。利用各種核苷酸具有不同等電的性質(zhì),用強堿性陰離子交換樹脂來分離。將上述核苷酸混合液調(diào)PH至8,用國產(chǎn)717樹脂上柱吸附,再依次用0.02mol/L甲酸、0.15mol/L甲酸、0.01mol/L甲酸+和0.1mol/L甲酸+0.1mol/L甲酸鈉洗脫,分別得到胞苷酸、腺苷酸、尿苷酸和鳥苷酸。(4)從腺苷酸制備肌苷酸鈉。在30℃下用麩皮培養(yǎng)米曲霉48h,加10倍水浸泡3h,得脫氨酶液;在腺苷酸液中加入10%的脫氨酶液,并在50-60℃和PH=6下反應(yīng)3h;加熱至100℃以殺酶,過濾,取清液真空濃縮、結(jié)晶得產(chǎn)品肌苷酸二鈉。2發(fā)酵法生產(chǎn)5’-肌苷酸鈉生產(chǎn)中采用的發(fā)酵法主要為葡萄糖直接發(fā)酵法,或葡萄糖家教生產(chǎn)肌苷,再磷酸化生成肌苷酸。(1)直接生產(chǎn)發(fā)酵——一步法。以葡萄糖為碳源,異變株或產(chǎn)氨短桿菌為生產(chǎn)菌,直接發(fā)酵生產(chǎn)肌苷酸。(2)二步法。以60-70g/L的葡萄糖為碳源,以枯草芽孢桿菌為生產(chǎn)菌,在30-32℃、PH=5-7下發(fā)酵80h生產(chǎn)肌苷;肌苷再與磷酸三乙酯反應(yīng)生成肌苷酸。生產(chǎn)方法由酵母所得核酸分解、分離而得。淀粉糖化液(葡萄糖)經(jīng)直接發(fā)酵法制得肌苷酸,作選擇性羥基磷酸化,再精制中和成鈉鹽后結(jié)晶而得。
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