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胰蛋白酶抑制劑
CAS No.: 9035-81-8
分子式: NULL
分子量: 錛?0000
備注: 中文名稱(chēng)胰蛋白酶抑制劑中文同義詞胰蛋白酶抑制劑來(lái)源于大棉豆(利馬豆);胰蛋白酶抑制劑來(lái)源于牛胰腺;胰蛋白酶抑制劑來(lái)源于大豆;胰蛋白酶抑制劑來(lái)源于雞蛋白;胰蛋白酶抑制劑來(lái)源于火雞蛋白;胰蛋白酶抑制劑(大豆)(+4℃);胰蛋白酶抑制劑(利馬豆);胰酶抑制劑英文名稱(chēng)Trypsininhibitor英文同義詞trypsininhibitorfromphaseoluslimensis(limabean);trypsininhibitor,defined(1x)solution;trypsininhibitor,kohlrabiseed;contrykal;iniprol;TRYPSININHIBITORFROMSOYBEAN>10000BEAA;Trypsininhibitorfromsoyabean;TRYPSINInhibitorextrapureCAS號(hào)9035-81-8分子式NULL分子量0EINECS號(hào)232-906-9相關(guān)類(lèi)別酶和輔酶;生化試劑;氨基酸;消化道激素;多肽及蛋白質(zhì)類(lèi);生物化學(xué)品;生化試劑-酶類(lèi);氨基酸類(lèi);標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì);基因組學(xué)和分子診斷;酶與輔酶;化學(xué)試劑;生化試劑-蛋白質(zhì);MiscellaneousBiochemicals;Chymotrypsin,alpha-EnzymeInhibitorsbyEnzyme;Chymotrypsin,α-EnzymeInhibitorsbyEnzyme;TrypsinInhibitors;Ato;ProteaseInhibitorSpecificityIndex;ProteaseInhibitors;Rto;DissociationIsletStemCellBiology;DissociationPrimaryHumanCellCulture;EndothelialCells;HumanUmbilicalVeinEndothelialCell(HUVEC)CultureCompanionProductsandSupplements;IsletStemCellIsolation;NeuralStemCellBiology;NeuralStemCellIsolation/Expansion;inhibitor;對(duì)照品Mol文件MolFile結(jié)構(gòu)式胰蛋白酶抑制劑性質(zhì)儲(chǔ)存條件-20°C溶解度H2O:>10mg/mL形態(tài)溶液在儲(chǔ)存期間顏色可能會(huì)變暗顏色白色至米白色PH值<7.4水溶解性Solubleinwater(10mg/ml),phosphatebuffers(10mg/ml),andbalancedsaltsolutions(1mg/ml).胰蛋白酶抑制劑用途與合成方法簡(jiǎn)介胰蛋白酶抑制劑(Trypsininhibitor,TI)是抑制胰蛋白酶的絲氨酸蛋白酶抑制劑,是大豆中主要的一類(lèi)抗?fàn)I養(yǎng)因子,它對(duì)植物本身具有保護(hù)作用,可防止大豆籽粒自身發(fā)生分解代謝。大豆胰蛋白酶抑制劑是一種多肽類(lèi)或是蛋白質(zhì),根據(jù)氨基酸殘基組成及差異性質(zhì)被分為不同種類(lèi)。目前從大豆中被分解出且研究較多的胰蛋白酶抑制劑主要有兩種,分別為Kunitz型胰蛋白酶抑制劑(KTI)和Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制劑(BBI)。KTI由181個(gè)氨基酸組成(圖1),含有四個(gè)半胱氨酸,相互形成兩個(gè)二硫鍵,反應(yīng)中心位于63號(hào)精氨酸與64號(hào)異亮氨酸之間,KTI主要對(duì)胰蛋白酶起到特異性的抑制作用,是主要的胰蛋白酶抑制因子。BBI含有大量的半胱氨酸,其顯著特點(diǎn)是具有兩個(gè)獨(dú)立的反應(yīng)中心(圖2黑色部分),一個(gè)位于第16號(hào)賴(lài)氨酸與第17號(hào)絲氨酸之間,特異性與胰蛋白酶結(jié)合;另一個(gè)位于第43號(hào)亮氨酸與第44號(hào)絲氨酸之間,特異性與糜蛋白酶結(jié)合。因此BBI能夠同時(shí)抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶活性。BBI結(jié)構(gòu)非常穩(wěn)定,不易通過(guò)加熱破壞。鈍化方法1.熱處理熱處理效果受到大豆品種、含水量、加熱溫度等因素影響。加熱不足達(dá)不到破壞胰蛋白酶抑制劑活性的目的,而加熱過(guò)度會(huì)使氨基酸,特別是賴(lài)氨酸、精氨酸和胱氨酸等受到破壞,還會(huì)使多種氨基酸如蛋氨酸、異亮氨酸和賴(lài)氨酸等消化率降低。2.化學(xué)處理化學(xué)處理一般都是利用化學(xué)物質(zhì)破壞胰蛋白酶抑制劑的二硫鍵,從而改變胰蛋白酶抑制劑的分子結(jié)構(gòu)達(dá)到滅活的目的。主要采用的化學(xué)物質(zhì)有亞硫酸鈉、偏重亞硫酸鈉、硫酸亞鐵以及一些帶有硫醇基的化合物。但用化學(xué)法處理后會(huì)存在試劑殘留,對(duì)原料有不良影響。3.超聲波處理在超聲波場(chǎng)的作用下,使胰蛋白酶抑制劑的分子結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,從而影響其活性。但是超聲設(shè)備成本較高,不適合小規(guī)模生產(chǎn)廠(chǎng)家使用。同時(shí),產(chǎn)生振動(dòng)也會(huì)導(dǎo)致一部分蛋白質(zhì)變性,降低整體營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。4.生物處理較為常見(jiàn)的生物處理有微生物發(fā)酵法和酶解法。某些微生物(如乳酸菌、枯草芽孢桿菌等)產(chǎn)生的特異性酶對(duì)大豆中的胰蛋白酶抑制劑有一定的滅活效果,通過(guò)Chemicalbook微生物發(fā)酵可以降低大豆中胰蛋白酶抑制劑活性。胰蛋白酶抑制劑本身是一種蛋白質(zhì),因此也可以通過(guò)蛋白酶酶解使其失活。酶解法相對(duì)于其他處理方法來(lái)說(shuō)成本較低,且酶是一種天然產(chǎn)物,安全性高,不會(huì)對(duì)人體或動(dòng)物健康造成不良影響,使用酶進(jìn)行處理可以確保產(chǎn)品的安全性和可靠性?;瘜W(xué)性質(zhì)本品是從牛胰、肺、腮等組織中提取的激肽釋放酶抑制劑,本身不是酶,由58個(gè)氨基酸殘基組成的堿性多肽,整個(gè)分子呈梨形,活性中心為賴(lài)氨酸。它能與多種蛋白酶的活動(dòng)中心競(jìng)爭(zhēng)一個(gè)賴(lài)氨?;种破浠顒?dòng)。本品為白色或微黃色粉末,無(wú)臭,溶于水,有可透析性,等電點(diǎn)為10-10.5。對(duì)高溫、酸、堿和酶都很穩(wěn)定。在稀酸中加熱至100℃,pH12.6時(shí)室溫放置24h仍穩(wěn)定,但pH12.8時(shí)活力開(kāi)始下降。在60-80℃能被嗜熱蛋白酶消化,其他酶不能使其失活。用途蛋白酶抑制劑。抑制胰蛋白酶,間接抑制糜蛋白酶、彈性蛋白酶、羧基肽酶。不良反應(yīng)和禁忌:少數(shù)人可發(fā)生過(guò)敏反應(yīng),出現(xiàn)紅斑、蕁麻疹、支氣管痙攣,應(yīng)停藥。靜脈注射過(guò)慢偶可引起嘔吐、惡心、腹瀉、肌痛、血壓變化。用途血纖維蛋白;血纖維蛋白原無(wú)降解鑒定試驗(yàn)生產(chǎn)方法方法一、牛肺為原料提取、鹽析將新鮮或冰凍牛肺絞碎后,用5倍量水?dāng)噭颍?.5mol/L硫酸調(diào)節(jié)pH為2,攪拌提取8h,過(guò)濾,濾渣同法再提取1次,合并兩次提取液,每升加硫酸銨277g,用5mol/L硫酸調(diào)pH為1.5,放置過(guò)夜。新鮮牛肺(或冰凍[水,H2SO4]→[pH2,8h]提取液[(NH4)2SO4]→[pH1.5]鹽析物去雜蛋白將鹽析物除去上清液,過(guò)濾,濾液用氫氧化鈉液調(diào)pH至5.5,再每升加硫酸銨255g,攪勻后靜置48h,過(guò)濾,得鹽析物。用9倍量水溶解鹽析物,攪拌2h后,置冰箱過(guò)夜,過(guò)濾,濾液中加入1/20量的三氯乙酸(50%),速加熱至80℃后,即冷卻至30℃以下,過(guò)濾。鹽析物[(NH4)2SO4]→[pH5.5,48h]鹽析物[三氯乙酸]→[先80℃,后30℃]濾液鹽析、溶解、鹽析濾液用氫氧化鈉(5mol/L)調(diào)pH為3,按每升加入硫酸銨610g攪拌使溶解,靜置過(guò)夜。取沉淀物,用4倍量新配制的pH5.5的0.1mol/L乙酸鈉緩沖液和1倍量0.4mol/L硼酸緩沖液溶解,按每升加入硫酸鎂1050g溶解,過(guò)夜,次日過(guò)濾,析出鹽析物。濾液[NaOH,(NH4)2SO4]→[pH3]沉淀物[NaAc,硼酸緩沖液,MgSO4]→[pH5.5]鹽析物透析、脫鹽、沉淀加4倍量水使鹽析出物溶解,用流動(dòng)自來(lái)水于10℃以下透析24h,加硅藻土過(guò)濾,濾液用強(qiáng)堿性季銨I型陰離子交換樹(shù)脂201×7與強(qiáng)酸性苯乙烯系陽(yáng)離子交換樹(shù)脂001×7(按201×7樹(shù)脂:001×7樹(shù)脂=3:1的比例)攪拌吸附20min,至無(wú)硫酸根離子。將樹(shù)脂濾過(guò),脫鹽液(pH7左右)加0.9%氯化鈉和1.5倍量丙酮析出沉淀,過(guò)濾,濾液再加4倍量丙酮析出沉淀,過(guò)夜。然后沉淀用丙酮、乙醚洗滌,干燥。鹽析物[水]→[10℃以下]濾液[陰離子、陽(yáng)離子樹(shù)脂]→脫鹽液[NaCl,丙酮]→[pH7]沉淀物去熱原、沉淀、干燥沉淀物用60倍量80%甲醇溶液溶解,于冰浴攪拌2h,過(guò)濾,按濾液體積的1%加30%的氯化鈉溶液和5倍量丙酮,沉淀過(guò)夜,離心,用丙酮洗滌,干燥,得沉淀物。再用60倍量無(wú)熱原水溶解,5mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至11,置冰箱中4d,過(guò)濾,濾液用冰醋酸調(diào)為pH4-5后,加入1%量的300g/L氯化鈉溶液和5倍量丙酮,析出沉淀,過(guò)夜,用丙酮、乙醚洗滌,干燥,即得成品。沉淀物[蒸餾水,NaOH]→[pH11]無(wú)熱原液[冰HAc,NaCl,丙酮]→[pH4-5]成品方法二、以人尿?yàn)樵系娜四蛞鹊鞍酌敢种苿?UTI)提取法原料處理、酸化取新鮮男性尿100L<操作全過(guò)程在0-4℃下進(jìn)行),經(jīng)雙層紗布過(guò)濾,用1mol/LNaOH液調(diào)節(jié)pH至8.5,得白色絮狀沉淀物,靜置2h,棄去沉淀得上清液,攪拌下緩緩滴加1mol/LHCl調(diào)pH4.0,生成細(xì)微沉淀,離心20min,除沉淀得酸化尿液。男性人尿[1mol/LNaOH]→[pH8.5]上清液[1mol/LHCl]→[pH4.0]酸化尿液吸附、洗脫取PolyerdeⅣ500g加入酸化尿液中,攪拌吸附2h,過(guò)濾,棄去濾液,吸附劑用常水洗滌至白色,再用2mol/LNH4HCO3液4L進(jìn)行洗脫,收集洗脫液。酸化尿液[PolyerdeIV]→吸附物[2mol/LNH4HCO3]→洗脫液鹽析、透析、濃縮、干燥將固體(NH4)2SO4加入洗脫液中,達(dá)80%飽和度,于4℃下靜置4-5h,離心30min,收集沉淀,再將沉淀溶于適量的蒸餾水中,加磷酸鹽緩沖液透析至鹽除盡,得透析液。將透析液濃縮,冷凍干燥,即得UTI成品。洗脫液[(NH4)2SO4,磷酸鹽緩沖液]→[4℃,蒸餾水]透析液[(濃縮,冷凍)]→UTI成品。
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